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Elisa试剂盒使用中常见的抗凝剂有哪些?
点击次数:573 更新时间:2022-05-18
  Elisa试剂盒的检测范围以ng/ml计。而常见的科研试剂盒中的样本中的目标蛋白,范围可随样本的类型而变化。所以实验前应通过文献和预实验的方法确定样本是否在所购的范围内,是很重要的步骤。
 
  Elisa试剂盒常见的样本处理方法:
 
  血清:将收集于血清分离管的全血标本在室温放置 2 小时或 4 度过夜,然后1000×g 离心20分钟,取上清即可。这是一个让血液自然凝固的过程,温度越低,凝集越缓慢,可根据需要添加促凝剂。
 
  血浆:血浆样本需要抗凝,一般建议用2.0%EDTA,1%肝素,3.8%C6H5Na3O7作为抗凝剂采集标本,并将标本在采集后的30分钟内于2~8度1000g离心15分钟,取上清即可检测。根据待检测目标物的性质不同选取不同的抗凝剂。
 
  C6H5Na3O7(柠檬酸钠):Ca2+有凝血作用,能与血液中的钙离子形成可溶性的螯合物,从而阻止血液凝固。配成 109mmol/L的浓度和血液1:9, 106mmol/L的浓度和血液1:4
 
  缺点:血液中溶解度低,抗凝作用较弱。
 
  优点:对凝血因子有很好的保护作用,大部分凝血试验都可用C6H5Na3O7抗凝。
 
  二胺四乙酸(EDTA)盐:与血液中的钙离子结合形成配位化合物, 从而阻止血液凝固。15g/L EDTA和血液 1:10
 
  优点:对红细胞和白细胞形态影响小。
 
  缺点:影响血小板的聚集。不适用于凝血实验和血小板功能相关实验的检测。
 
  肝素:通过与抗凝血酶Ⅲ结合,增强抗凝血酶的作用,灭活丝氨酸蛋白酶,从而可阻止凝血酶的形成和阻止血小板聚集,阻止血液凝固。肝素钠 1g/L 与血液 1:10
 
  优点:抗凝能力强、不影响血细胞体积、不易溶血、能耐高温。
 
  缺点:引起白细胞聚集。肝素抗凝血应于短时间内使用,否则放置过久血 液又可凝固。

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