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操作人员使用Elisa试剂盒前的操作须知介绍
点击次数:360 更新时间:2022-06-27
  Elisa试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA),往预先包被GSH捕获抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并*洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成较终的黄色,颜色的深浅和样品中的GSH呈正相关,用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。
 
  Elisa试剂盒的操作须知:
 
  1.分析前质控
 
  ① 特色 :在固相外表组装免疫活性物质形成“免疫吸附剂”;
 
  ② 酶标记免疫活性物质,进行信号扩大;
 
  ③ 有二步温育反应二次洗涤过程;
 
  ④ 灵敏度特异性相对较高;
 
  ⑤ 局限性:只能检测到ng;
 
  ⑥ 精密度差(批内CV15-20%);
 
  ⑦ 线性规模窄(一个数量级);
 
  ⑧ 存在"HD-HOOK"效应。
 
  2.试验检测人员需经过培训,把握这几方面的技术知识:
 
  ① 检验项目的基本原理;
 
  ② 临床意义;
 
  ③ 熟悉检测技巧,了解易出差错的环节及难点;
 
  ④ 熟悉检测试剂功能(包括试剂盒组成,包被片段及其组成);
 
  ⑤ 熟悉检测仪器的原理及功能;
 
  ⑥ 把握数据处理的能力和质量操控知识;
 
  ⑦ 某些特别项目的检测如抗HIV等需经有关部门组织的专门培训班,考试合格后持证上岗。

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