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人脐带单核细胞提取物操作要点
点击次数:290 更新时间:2023-03-02

人脐带单核细胞提取物操作要点:

1)将培养基在37℃水浴锅预热;准备一个15mL无菌的离心管,加入8mL预热培养基。

2)将冻存细胞从液氮罐中取出,快速放入37℃水浴锅中复温(可准备一洁净的烧杯,装满37℃的水,细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内,再逐步转移到水浴锅中)。轻轻晃动冻存管,使细胞能在1~2min内*解冻,使细胞能尽快通过最易受损的温度段(-5~0℃)。注意冻存管管口不能没入水中,BRL(大鼠肝细胞)避免引起污染。

3)用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内,将管内细胞转移至准备好的离心管内,轻轻吹打液体,使细胞均匀分散,降低DMSO浓度,吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次,均转移至离心管内。

4)800rpm离心5min,弃上清,加入新鲜的培养基,吹打制成细胞悬液。

5)将细胞悬液转移至T25细胞瓶内,补加适量的培养基,轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀,放入温箱内培养。

6)第二天观察细胞贴壁生长情况,换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养,待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代,细胞活力恢复后才能进行后续的实验。

alpha 2 Macroglobulinα2巨球蛋白抗体

ACCSLACCSL蛋白抗体

AFP甲胎蛋白抗体

Mint3β淀粉样前体蛋白结合蛋白3抗体

ASTN2星形肌动蛋白抗体

TREX1系统性红斑狼疮相关蛋白TREX1抗体

phospho-ATRIP 磷酸化系统性红斑狼疮先关蛋白TREX1抗体

Phospho-ATRIP 磷酸化系统性红斑狼疮相关蛋白TREX1抗体

AP2M1接头相关蛋白复合体AP-2μ链1抗体

Phospho-AP2M1 磷酸化接头相关蛋白复合体AP-2μ链1抗体

Annexin A7膜粘连蛋白7抗体

C3orf153号染色体开放阅读框15抗体

APOB48R载脂蛋白B受体抗体

ABCA2三磷酸腺苷结合盒转运蛋白2抗体

ApoB 载脂蛋白B抗体

ALOX15B花生四烯酸15脂氧合酶2抗体

APOC4载脂蛋白C4抗体

ARH低密度脂蛋白受体衔接蛋白抗体

AUP1原始广泛存在蛋白1抗体

ANKRD37锚蛋白重复结构域蛋白37抗体

A4GALTα1,4-半乳糖基转移酶1

AGTRAP血管紧张素Ⅱ受体相关蛋白抗体


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