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哪些因素会影响Elisa试剂盒的测定结果?
点击次数:413 更新时间:2021-03-26
  Elisa试剂盒被广泛应用于各种抗原和抗体测定,具有灵敏度高,操作简略等优点,但是在详细实验过程中影响要素较多,而且要按照严厉的阐明要求,在临床检验中除正常反响外,有时常可见到些错误成果(即假阳性或假阴性成果)。
 
  影响ELISA测定错误成果的原因主要有:
 
  ①标本要素;
 
  ②试剂要素;
 
  ③操作要素。
 
  一、类风湿因子
 
  人血清中IgM、IgG型类风湿因子(RF)能够与ELISA系统中的捕获抗体及酶符号二抗的FC段直接结合,然后导致假阳性。
 
  解决办法:
 
  .用F(ab)2替代完好的IgG;
 
  2.标本用联有热变性(63℃,0 min)IgG的固相吸附剂处理(将热变性IgG加入到标本稀释液中同样有用);
 
  3.检测抗原时,能够用2-巯基yi醇等加入到标本稀释液中,使RF降解。
 
  二、补体
 
  ELISA系统中固相抗和符号二抗过程中,抗体分子发作变构,其FC段的补体Cq分子结合位点被暴露出来,使Cq 能够将二者连接起来,然后形成假阳性。
 
  解决办法:
 
  .用EDTA稀释标本;
 
  2.用53℃,0 min或56℃,30 min加热血清使Cq灭活。
 
  三、嗜异性抗体
 
  人类血清中含有能与啮齿类动物(如鼠等)Ig(s) 结合的天然嗜异性抗体,可将ELISA系统中抗和二抗连接起来,也能形成假阳性。
 
  解决办法:
 
  可在标本稀释液中加入过量的动物Ig(s),但加入量不足或亚类不同时无效。
 
  四、嗜靶抗原的本身抗体
 
  抗甲状腺球蛋白、抗胰岛素等嗜靶抗原的本身抗体,有时能与靶抗原结合形成复合物,在ELISA方法中均可干扰抗原抗体测定成果。
 
  解决办法:
 
  测定需用理化方法将其解离后再测定

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