elisa实验包被过程解析
点击次数:920 更新时间:2016-07-19
包被用抗原
天然抗原、重组抗原和合成多肽抗原三大类。合成多肽抗原是抗原决定簇的氨基酸序列人工合成的多肽片段。一般只含有一个抗原决定簇,纯度高,特异性也高,但由于分子量太小,往往难于直接吸附于固相上。借助于偶联物与固相载体的吸附,间接地结合到固相载体表面。
包被用抗
IgG对聚苯乙烯有强吸附力,其联结发生在Fc段上,抗体结合点暴露于外。取材于抗血清或含单克隆抗体的培养液.须除去杂抗体后才能用于ELISA,以保证试验的特异性。
实验原理
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中牛病毒性腹泻病毒(BVDV)表达。用纯化的牛病毒性腹泻病毒(BVDV)抗体包被微孔板,制成固相抗体,可与样品中病毒性腹泻病毒(BVDV)
相结合,经洗涤除去未结合的抗原和其他成分后再与 HRP 标记的病毒性腹泻病毒(BVDV)
抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过*洗涤后加底物 TMB 显色。TMB 在 HRP 酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成zui终的黄色。用酶标仪在 450nm 波长下测定吸光度(OD 值),与 CUTOFF 值相比较,从而判定标本中牛病毒性腹泻病毒(BVDV)
的存在与否。