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怎样操作ELISA试剂盒
点击次数:547 更新时间:2017-04-20
   ELISA试剂盒中,血清样本的加入几乎是*的要使用微量加样器加入样本的步骤。使用微量加样器加样必须注意的关键点是:
  加样不可太快,要避免加在孔壁上部,不可溅出和产生气泡。加样太快,无法保证微量加样的准确性和均一性。加在孔壁上部的非包被区,易导致非特异吸附。溅出会对邻近孔产生污染。出现气泡则反应液界面有差异。
  试剂的加入在国产试剂盒中基本上均是从滴瓶中滴加,除了要注意滴加的角度外,滴加的速度也很重要,滴加太快,很容易出现重复滴加或加在两孔之间的现象,这样就会在孔内的非包被区出现非特异吸附,从而引起非特异显色。
  用于检测未知抗体的间接法
  .用包被缓冲液将已知抗原稀释至~0μg/ml,每孔加0.ml,4℃过夜;
  2.次日洗涤3次;
  3.加一定稀释的待检样品(未知抗体)0.ml于上述已包被之反应孔中,置37℃孵育小时,洗涤;
  4.(同时做空白、阴性及阳性孔对照)于反应孔中,加入新鲜稀释的酶标第二抗体(抗抗体)0.ml;
  5.37℃孵育30-60分钟,洗涤;
  6.zui后一遍用DDW洗涤
  所以,有时候一份标本用相同的elisa试剂盒这次测定为阳性,下次测定为阴性,往往就是上述加样及试剂的错误所致。

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