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Hcy Elisa试剂盒介绍的提取技术
点击次数:590 更新时间:2017-07-28

Hcy Elisa试剂盒介绍的提取主要有以下四步:
.原料处理:将新鲜的猪肠用清水仔细清洗去除内外污物和外部皮肤脂肪后,绞碎成糜状,并在充分搅拌下,加入等量的水混合后,再加入少许溶度为0.%的防腐剂混合均匀。
2.酶解提取:先将上述原料在充分搅拌下,用少量稀碱液精细地调节至PH值为8-9再加入事先已经绞碎的新鲜胰浆作为酶解剂,搅匀后,缓慢升温至40度左右,继续搅拌,并保持料液PH=7.5-8,保持液温于37-40度下,酶解3-4小时,然后升温至47-50度,维持PH值=8.0-8.5,再酌情补加少许猪胰浆后,继续酶解4-5小时,在上述酶解过程中,如果酶解料液的PH纸复查有所下降之际,就应该及时用少许稀碱液仔细调整。盐酸调整其PH=5.5-6,然后升温至80度。
3.离子交换吸附;先将上述酶解提取液冷却至室温,仔细捞除浮于液面的油脂薄片层,控制升温至45度,停止加热,在搅拌下加入事先预处理好的D-254型树脂已有效的吸附料液中的成分,新树脂的用量一般为料液的2.55-3%,用过后的再生树脂应酌情加大其用量,搅拌、吸附处理3个小时后静置过滤,滤液可作为治疗冠心病的新药冠心舒的原料。
将上述已经吸附有肝素成分的D-254树脂先用清水充分漂洗,干净后,再用大约一倍的.2mol/L氯化钠溶液对洗涤好的D-254树脂进行操作:*次洗脱液为树脂体积的.5倍左右,大约洗脱4小时,第二次洗脱为树脂体积的0.5倍左右 ,洗脱时间为小时。滤干树脂,将洗脱液予以合并。 将上述所得的洗脱液调节到PH=0-,搅拌30分钟后,静置6小时,然后仔细的析出上层清液,下部沉淀物尽量的抽滤至干。合并清液和滤液,精细调节PH=6.0-6.5,加入.5倍量的95%乙醇沉淀过夜,翌日,仔细地烘吸出上层清液,收集下部沉淀物,抽滤至干。Hcy Elisa试剂盒经真空烘干,即得粗品。
4.精制:将所得粗品用2%的氯化钠溶液*溶解,制成其溶度大约为8%的溶液,在此过程中可适当的升温助溶。 将上述料夜用5mol/L氢氧化钠溶液精细地调节PH=8.0-8.2,升温至78-80度,按照每一亿单位加入0.5-0.2mol/L高锰酸钾溶液至紫红色不再褪色时即为*次氧化操作的终点;再加入少许饱和的亚硫酸钠溶液以红色刚好褪尽时为宜。 待上述料液适当冷却后,
精细过滤一次,当其滤液温度下降至36度时,复滤一次,在充分搅拌下,缓慢的加入少量的3%-5%,在25-27度下进行第二次氧化,时间为6-24小时,当氧化过程结束后,将料液用“除菌过滤器"过滤,滤液用少许盐酸调节至PH=5.8-6.5,加入0.9倍量的95%乙醇,于5-0度条件下沉淀处理24小时。 收集上述沉淀物,用少量0%氯化钠溶液溶解后,再加上3-4倍的95%乙醇进行沉淀,收集沉淀物。沉淀物经无水乙醇脱水,研细,再经丙酮脱水,研细,再经丙酮脱水,Hcy Elisa试剂盒远红外线真空烘干,即得精。

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