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是什么原因使Hcy Elisa试剂盒样本值低于空白值呢?
点击次数:582 更新时间:2017-12-18

在做Hcy Elisa试剂盒实验的时候,也许有的人做出来的结果不理想,实验中总会遇到这样那样的问题,今天将跟大家分析是什么原因使ELISA样本值低于空白值的问题!
*、实验误差
    误差分为三类,系统误差、随机误差和过失误差。这三类误差中,系统误差对样本值和空白值之间的差异无影响。ELISA样本值低于空白值在误差方面主要来源于随机误差和过失误差。
    .随机误差 Random Error
    无法控制的变因,使测量值产生随机分布的误差,服从统计学上的正态分布。从统计学上来看,测量值有99%的置信限在±3SD之间,如果CV值是20%,随机误差的边界就是±60%,也就是说在CV值20%的状况下,样本值低于空白值60%之内,有可能是随机误差的影响,特别是空白值只有一个值时。
    随机误差不可消除,只能通过多次测量获得的均值尽量逼近真值。降低随机误差的解决方案是增加空白值的重复数量,一般认为空白值重复0次,测量均值接近真值。
    方案2是提高实验技能,也能够有效降低随机误差的影响。如果CV值在5%,样本值趋近于零时,在统计上样本值将不会低于空白值5%。
 
   2.过失误差 Gross Error
    主要是由于测量者的疏忽,犯了不应有的错误造成的。过失误差是可以避免的。针对于ELISA样本值低于空白值的问题,过失误差产生的原因多数来源于空白孔HRP的重复加样或污染或洗涤不干净,造成空白值偏高,相对比来说,样本值低于空白值。解决方案就是重复实验,规范操作。
第二、基质效应 
    分析中,基质指的是样本中被分析物之外的组分,基质常常对分析物的分析过程有显著的干扰,并影响分析结果的准确性,这些影响和干扰被称为基质效应。ELISA试剂盒在开发过程中,标准品不能采用人或动物血清、血浆作为标准曲线的稀释液,只能采用其模拟物。模拟物与被测样本在蛋白丰度、复杂性、pH等因素都会存在差异。当样本的基质与其模拟物相比,降低抗原抗体的结合,便产生了样本值低于空白值的现象。造成样本值无法计算出数值,或者数值为负。
    目前zui常用的去除基质效应的方法是,通过已知分析物浓度的标准样品,同时尽可能保持样本中的基质不变,建立一个校正曲线。
    Hcy Elisa试剂盒当单个样本或少量样本值低于空白值时,可能是误差原因,这时应增加重复,提高操作技能。当大量样本都低于空白值时,应考虑基质效应的影响,建立校正曲线予以修正。
≥98%            Triptolide
98%            wilforlide A
97%            Triptonide
≥98%            Reserpine
≥98%            Roburic acid
≥98%            Forsythin
≥95%            Forsythiaside A
≥98%            Forsythoside B
≥98%            Liensinine perchlorate
≥94%            GANODERIC ACID A
Hcy Elisa试剂盒

 

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