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TSZ Elisa试剂盒实验经验分享
点击次数:609 更新时间:2017-12-25

TSZ Elisa试剂盒检测系统是免疫学反应应用到科研中zui为灵敏的技术手段,有着十分重要的作用。操作步骤虽然看起来比较简单但是实验过程有很多的操作要点需要掌握,操作步骤中如果稍有不慎,操作不合理的地方,就会造成很多问题从而影响到检测的准确性,大大降低试验质量。比如说花板,假阳性,全显色,全部显色,显色比空白还低……这就需要我们在实验过程中多做总结,逐步完善,还有就是要多多学习,分享学习心得。下面就大体总结一下ELISA实验的常见问题和解决方法,同大家一起分享。
、包被原的性质很重要,蛋白浓度,是否降解,这关系到你做出的抗体可不可以被其识别,所以保存抗原很重要,我做重组蛋白时,师兄都严格警告我一定要在冰浴下缓慢融化就是这个道理。还有有的包被原可能不是蛋白,对于和脂类物质或小分子物质我们要事先对其改造再加以包被,我把方法简要的列出如下:①亲和素:先亲和素先包被载体,加入化的DNA,这种包被方法均匀、牢固,已扩大应用于各种抗原物质的定量测定。②脂类物质:可将其在有机溶剂(例如乙醇)中溶解后加入ELISA板孔中,开盖置冰箱过夜或冷风吹干,待酒精挥发后,让脂质自然干固在固相表面。③小分子必须依靠和大的蛋白载体偶联后才能固定在固相载体上。
2、包被液的选择,一般选择ph9.6的碳酸盐缓冲液。但有时由于试验的需要,包被原的特殊性也可能采用中性的缓冲溶液来包。应注意以下原理:由于蛋白质与聚苯乙烯固相载体是通过物理吸附结合的,靠的是蛋白质分子结构上的疏水基团与固相载体表面的疏水基团间的作用,TSZ Elisa试剂盒这种物理吸附是非特异性的,受蛋白质的分子量、等电点、浓度等的影响,大分子蛋白质较小分子蛋白质通常含有更多的疏水基团,故更易吸附到固相载体表面。具体的试验还要有坚固的理论外也要实践,看一下zui终可不可以应用到自己试验当中去。常用的包被液除了刚才提到的pH9.6碳酸盐缓冲液,还有pH7.2的磷酸盐缓冲液和pH7-8的Tris-HCL缓冲液等等。
bis(2-methoxyethyl)amine    对异氰酸酯    40736    Methyl Isovalerate
双(2-甲氧基乙基)胺    04-2-    40737    methyl levulinate
-95-5    4-chlorobenzylmethylamine    40738    Methyl Mercaptan
Di-n-butylamine    N-甲基-4-氯苄胺    40739    methyl o-anisate
二丁胺    04--0    40746    Methyl pentafluoropropionate
-92-2    p-aminophenylethanol    40747    Methyl pentanoate
2-(2-Ethoxyethoxy)ethanol    对氨基苯乙醇    40749    Methyl propionate
二甘醇单    04-0-9    40750    methyl p-tolyl sulphide
TSZ Elisa试剂盒

 

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