Elisa生物试验是一种敏感性高，特异性强，重复性好的实验诊断方法。由于其试剂稳定、易保存，操作简便，结果判断较客观等因素，已广泛应用在免疫学检验的各领域中。Elisa试剂盒适用于体外定性检测人血清或血浆中的抗人类戊型肝炎(HEV)病毒 IgM 抗体ELISA检测。
 

　　Elisa试剂盒的操作方法：
 

　　双抗体夹心法
 

　　.包被：用0.05MPH9.牰碳酸盐包被缓冲液将抗体稀释至蛋白质含量为～0μg/ml。在每个聚苯乙烯板的反应孔中加0.ml，4℃ 过夜。次日，弃去孔内溶液，用洗涤缓冲液洗3次，每次3分钟。(简称洗涤，下同)。
 

　　2.　加样：加一定稀释的待检样品0.ml于上述已包被之反应孔中，置37℃ 孵育小时。然后洗涤。(同时做空白孔，阴性对照孔及阳性对照孔)。
 

　　3.　加酶标抗体：于各反应孔中，加入新鲜稀释的酶标抗体(经滴定后的稀释度)0.ml。37℃ 孵育0.5～小时，洗涤。
 

　　4.　加底物液显色：于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.ml，37℃ 0～30分钟。
 

　　5.　终止反应：于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml。
 

　　6.　结果判定：可于白色背景上，直接用肉眼观察结果：反应孔内颜色越深，阳性程度越强，阴性反应为无色或较浅，依据所呈颜色的深浅，以“+”、“-”号表示。也可测OD值：在ELISA检测仪上，于450nm(若以ABTS显色，则40nm)处，以空白对照孔调零后测各孔OD值，若大于规定的阴性对照OD值的2.倍，即为阳性。
 

　　间接法
 

　　.用包被缓冲液将已知抗原稀释至～0μg/ml，每孔加0.ml，4℃过夜；
 

　　2.次日洗涤3次；
 

　　3.加一定稀释的待检样品(未知抗体)0.ml于上述已包被之反应孔中,置37℃孵育小时,洗涤；
 

　　4.(同时做空白、阴性及阳性孔对照)于反应孔中，加入新鲜稀释的酶标二抗体(抗抗体)0.ml；
 

　　5.37℃孵育35-60分钟，洗涤；
 

　　6.’用DDW洗涤。
 

　　其余步骤同“双抗体夹心法”的4、5、6。