HCE-T人角膜上皮细胞；HCE-T

细胞处理：

1） 冻存细胞的复苏：

将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入到含4-6mL培养基的离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心3-5min，弃去上清液，培养基重悬细胞。然后将细胞悬液加入含6-8ml培养基的培养瓶（或皿）中37℃培养过夜。第二天显微镜下观察细胞生长情况和细胞密度。

2） 细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。

对于贴壁细胞传代可以参考以下方法：

1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。

2. 加入0.25％（w / v）-0.53 mM EDTA于培养瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL），置于37℃培养箱中消化1-2分钟（难消化的细胞可以适当延长消化时间），然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加入3-4ml含10%FBS的培养基来终止消化。

3.轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心3-5min，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。将细胞悬液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照说明书要求配置的新的培养基以保持细胞的生长活力，后续传代根据实际情况按1:2~1:5的比例进行。

3）细胞冻存: 收到细胞后建议在培养前3代时冻存一批细胞种子以备后续实验使用。

HCE-T人角膜上皮细胞；HCE-T

商品属性

商品介绍

细胞别称；HCE-T ；人角膜上皮细胞

种属来源；人

组织来源；角膜

生长特性；贴壁生长

细胞形态；上皮细胞样

背景简介；该细胞系源自一名49岁女性角膜组织建立，通过SV40-Adeno 载体转化角膜细胞。64kD 角蛋白产生

细胞代数；10代以内

细胞规格；1×106cells/T25培养瓶或者1mL冻存管包装

支原体检测；无

培养基；DMEM/F12+ 15% FBS+ 5μg/mL Insulin + 10ng/mL EGF＋1% PS

培养条件；气相：95%空气+5%二氧化碳；温度：37℃

细胞传代培养操作步骤：

（1）当显微镜下细胞形态和生长密度达到90%时，进行传代。

（2）吸弃培养液。添加PBS清洗1~2次，摇匀后弃掉。

（3）加入覆盖瓶底量的且含有EDTA。

（4）培养瓶放入37℃培养箱进行消化，3min左右拿出，用显微镜观察细胞有无超过80%的量，发生收缩变圆、细胞间隙变大。轻轻拍打培养瓶使剩余细胞脱落，加入2倍量的中止消化，并吹打均匀，避免消化过度。

（5）细胞悬液吸至离心管内，1000rpm/min离心3~5min。

（6）吸弃上清，加入培养液重悬细胞，吹打细胞使其均匀分散。

（7）吸弃细胞悬液，选择适合的密度接种到新培养瓶中，补充培养液并摇匀，放置37℃的CO2培养箱进行培养。

（8）根据细胞生长状态确定换液或传代时间。

（9）细胞冻存

细胞接收后的处理：

1）收到细胞后，75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h，若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染，请拍照后及时联系我们。

2）请在4或5X显微镜下确认细胞状态，同时给刚收到的细胞拍照（10×，20×）各2-3张以及培养瓶外观照片一张留存，作为售后时收到时细胞状态的依据。

3）贴壁细胞：细胞在37℃培养箱中放置2-3h，显微镜下观察细胞的生长和贴壁情况，有些贴壁细胞在快递运送过程中会因振动脱落和脱落后成团的情况。若镜下观察细胞的生长密度若在60%以下，可去除培养瓶中灌液培养基（若有未贴壁的细胞需要离心回收，重悬打入到原培养瓶中）,加入新配制的培养基6-8mL，放到细胞培养箱中继续培养。若细胞生长密度达70%-80%以上，可以对细胞进行传代处理。传代过程中，若因运输振动脱落的细胞需要离心回收。

公司正在出售的产品：

大鼠细胞外基质金属蛋白酶诱导因子(EMMPRIN)检测试剂盒 ，英文名： EMMPRIN ELISA Kit

Mouse neuropeptide Y (NP-Y) ELISA Kit 小鼠神经肽Y(NP-Y)检测试剂盒

MouseapoproteinB100,apo-B100ELISAKit 小鼠载脂蛋白B100(apo-B100)检测试剂盒 96T/48T 进口分装

CLIAKitforHSP-90(MouseHeatShockProtein90)ELISAKit小鼠热休克蛋白90

细胞JNK1激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C)20次

ELISAKitIL-2sRβ大鼠白介素2可溶性受体β链

NRP1重组食蟹猴 Neuropilin-1 / NRP1 蛋白 Protein

IL-2 (Interleukin-2 0.5mgIL-2 (Interleukin-2)Mouse、Ret 白介素2抗原(大、小鼠)

PDE4B重组人 PDE4B / DPDE4 蛋白 (His & GST 标签) Protein

DPEP1 Protein Human 重组人 Dehydropeptidase-I / DPEP1 蛋白

CHI3L1 Protein Mouse 重组小鼠 CHI3L1 / YKL40 / gp39 蛋白

IL-2 (Interleukin-2 0.5mgIL-2 (Interleukin-2)Mouse、Ret 白介素2抗原(大、小鼠)

DPEP1 Protein Human 重组人 Dehydropeptidase-I / DPEP1 蛋白

NRP1重组食蟹猴 Neuropilin-1 / NRP1 蛋白 Protein

CHI3L1 Protein Mouse 重组小鼠 CHI3L1 / YKL40 / gp39 蛋白

PDE4B重组人 PDE4B / DPDE4 蛋白 (His & GST 标签) Protein

HCE-T人角膜上皮细胞；HCE-T小鼠抗血小板抗体IgG/M/A(PA-IgG/M/A)ELISA 试剂盒 96T/48T

Human noradrenaline (NA) ELISA Kit 人去甲(NA)检测试剂盒

HumanFibrinELISAKit 人血纤蛋白(Fibrin)检测试剂盒 96T/48T 进口分装

Humanamiodarone,AD检测试剂盒人呋同(AD)检测试剂盒规格：96T/48T

植物蛋白巯基/结合巯基含量比色法定量检测试剂盒20次

MonkeyIerferonγ,IFN-γELISAKit猴γ干扰素(IFN-γ)检测试剂盒规格：96T/48T

小鼠骨粘连蛋白(ON)检测试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

小鼠骨形成蛋白6(BMP-6)检测试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

小鼠骨形成蛋白(BMPs)检测试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

小鼠骨特异性碱性0酸酶B(ALP-B)检测试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装