KYSE-30人食管鳞状细胞癌细胞

细胞处理：

1） 冻存细胞的复苏：

将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入到含4-6mL培养基的离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心3-5min，弃去上清液，培养基重悬细胞。然后将细胞悬液加入含6-8ml培养基的培养瓶（或皿）中37℃培养过夜。第二天显微镜下观察细胞生长情况和细胞密度。

2） 细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。

对于贴壁细胞传代可以参考以下方法：

1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。

2. 加入0.25％（w / v）-0.53 mM EDTA于培养瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL），置于37℃培养箱中消化1-2分钟（难消化的细胞可以适当延长消化时间），然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加入3-4ml含10%FBS的培养基来终止消化。

3.轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心3-5min，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。将细胞悬液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照说明书要求配置的新的培养基以保持细胞的生长活力，后续传代根据实际情况按1:2~1:5的比例进行。

3）细胞冻存: 收到细胞后建议在培养前3代时冻存一批细胞种子以备后续实验使用。

KYSE-30人食管鳞状细胞癌细胞

商品属性

商品介绍

种属来源：人

性别年龄：男性，64岁

生长特性：贴壁生长

细胞形态：上皮细胞样

细胞规格：1 X 106cells/T25或1 mL冻存管

培养条件：RPMI 1640/ Ham's F12 + 10% fetal bovine serum (FBS)+1%P/S37 ℃, 5% CO2

冻存条件：90% FBS + 10% DMSO

传代方法：1:3-1:5传代, 2-3天传1代

细胞传代培养操作步骤：

（1）当显微镜下细胞形态和生长密度达到90%时，进行传代。

（2）吸弃培养液。添加PBS清洗1~2次，摇匀后弃掉。

（3）加入覆盖瓶底量的且含有EDTA。

（4）培养瓶放入37℃培养箱进行消化，3min左右拿出，用显微镜观察细胞有无超过80%的量，发生收缩变圆、细胞间隙变大。轻轻拍打培养瓶使剩余细胞脱落，加入2倍量的中止消化，并吹打均匀，避免消化过度。

（5）细胞悬液吸至离心管内，1000rpm/min离心3~5min。

（6）吸弃上清，加入培养液重悬细胞，吹打细胞使其均匀分散。

（7）吸弃细胞悬液，选择适合的密度接种到新培养瓶中，补充培养液并摇匀，放置37℃的CO2培养箱进行培养。

（8）根据细胞生长状态确定换液或传代时间。

（9）细胞冻存

细胞接收后的处理：

1）收到细胞后，75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h，若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染，请拍照后及时联系我们。

2）请在4或5X显微镜下确认细胞状态，同时给刚收到的细胞拍照（10×，20×）各2-3张以及培养瓶外观照片一张留存，作为售后时收到时细胞状态的依据。

3）贴壁细胞：细胞在37℃培养箱中放置2-3h，显微镜下观察细胞的生长和贴壁情况，有些贴壁细胞在快递运送过程中会因振动脱落和脱落后成团的情况。若镜下观察细胞的生长密度若在60%以下，可去除培养瓶中灌液培养基（若有未贴壁的细胞需要离心回收，重悬打入到原培养瓶中）,加入新配制的培养基6-8mL，放到细胞培养箱中继续培养。若细胞生长密度达70%-80%以上，可以对细胞进行传代处理。传代过程中，若因运输振动脱落的细胞需要离心回收。

公司正在出售的产品：

大鼠类(TPS)检测试剂盒 ，英文名： TPS ELISA Kit

Mouse free prostate specific aigen (fPSA) ELISA Kit 小鼠游离前列腺特异性抗原(fPSA)检测试剂盒

Ratapelin12,AP12ELISAKit 大鼠apelin12(AP12)检测试剂盒 进口分装

CLIAKitforGABA(HumanGamma-aminobyricacid)ELISAKit人γ氨基

细胞过氧化氢(HYDROGENPEROXIDE)活性荧光定量检测试剂盒20次

RatProgesterone,PROGELISAKit大鼠孕激素/孕同(PROG)检测试剂盒

CSNK2A1重组小鼠 CSNK2A1 / CK2A1 蛋白 (His & GST 标签) Protein

促生长激素释放激素(GHRH)重组蛋白 Recombinant Growth Hormone Releasing Hormone (GHRH)

LIF重组人 LIF 蛋白  Protein

FCGR3A Protein Human 重组人 CD16a / FCGR3A 蛋白 (176 Val, His & AVI 标签)

TNFSF8 Protein Cynomolgus 重组食蟹猴 CD153 / CD30L / TNFSF8 蛋白 (His 标签)

AD7C-NTP/NTP/AF peptide 神经丝蛋白蛋白多肽抗原(人 0.5mgAD7C-NTP/NTP/AF peptide 神经丝蛋白蛋白多肽抗原(人)

FCGR3A Protein Human 重组人 CD16a / FCGR3A 蛋白 (176 Val, His & AVI 标签)

FCGR1重组小鼠 CD64 / FCGR1 蛋白 (His & AVI 标签), Biotinylated Protein

REG4 Protein Rat 重组大鼠 REG4 蛋白 (His 标签)

MSLN重组人 MSLN / Mesothelin 蛋白  Protein

KYSE-30人食管鳞状细胞癌细胞小鼠二酰基甘油(DAG/DG)检测试剂盒

Rat endothelial niic oxide syhase 3 (eNOS-3) ELISA Kit 大鼠内皮型合成酶3(eNOS-3)检测试剂盒

Humahrombihrombomodulincompound,T-TMELISAKit 人血栓调节蛋白复合物(T-TM)检测试剂盒 进口分装

Humanapoptosisproteaseactivatingfactor-1,Apaf-1检测试剂盒人凋亡蛋白酶激活因子1(Apaf-1)检测试剂盒

植物叶片活性叶绿体分离试剂盒20次

Humaissueinhibitorsofmetalloproteinase4，TIMP-4ELISAKit人基质金属蛋白酶抑制因子4(TIMP-4)检测试剂盒

酰基转移酶（AAT）试剂盒   可见分光光度法   50管/48样

脱羧酶（PDC）试剂盒   紫外分光光度法    50管/48样

脂蛋白酯酶（LPL）＆肝脂酶（HL）试剂盒   可见分光光度法    50管/24样

甘油三酯（TG）含量测定试剂盒   可见分光光度法    50管/48样