人卵巢成纤维细胞培养试剂盒说明书

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人卵巢成纤维细胞培养试剂盒【Human Ovary PrimacellTM：Normal Ovarian Firbroblasts】
     人卵巢成纤维细胞培养试剂盒说明书人卵巢成纤维细胞分离自正常人卵巢结缔组织。其中，卵巢成纤维细胞主要功能：（）成纤维细胞在体外易于培养。（2）卵巢损伤后，成纤维细胞能修复和重塑卵巢。（3）能在卵巢炎症时有效控制炎症扩散。 虽然卵巢结缔组织机械韧性很强，但利用本公司试剂盒中提供的卵巢结缔组织分离体系来分离，EDTA/EGTA处理过的薄的卵巢结缔组织片能使得卵巢结缔组织中成纤维细胞的一些功能特性发生改变，从而将成纤维细胞分离开来。

本试剂盒适用于分离培养新生儿或成年人的卵巢成纤维细胞。本体系提供了佳的组织分离条件，分离单个细胞的效率是已出版文献中所报道的5~6倍。此外，本体系还能保证所分离的细胞在培养基中具有很高的活性。 人卵巢成纤维细胞细胞培养试剂盒适合于培养人的卵巢成纤维组织细胞。本试剂盒包含： （）OptiTDSTM人卵巢成纤维细胞组织解离液（3×ml） （2）人卵巢成纤维细胞组织处理缓冲液（00ml） （3）人卵巢成纤维组织洗液(5 x 00 ml) （4）人卵巢成纤维细胞生长因子（ml500X）及血清（5x0ml） （5）人卵巢成纤维细胞基础培养基(5 x 00ml) （6）人卵巢成纤维组织预备液 ( x 00 ml) （7）人卵巢成纤维细胞培养试剂盒使用说明书
培养步骤：
人卵巢成纤维细胞培养试剂盒说明书对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化-2分钟，然后在显微镜下观察Ⅱ型肺泡上皮细胞|细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按：2到：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按：2到：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二：可选择半数换液方式，弃去半数培养基后，将剩余细胞悬起，将细胞悬液按：2到：3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。​

植物杆菌 Lactobacillus plantarumKU82(人外周血嗜碱性白血病细胞)

三叶草根瘤菌 Rhizobium trifolii土壤杆菌属 Agrobacterium sp.

SW 353(人骨肉瘤细胞)产油油脂酵母 Lipomyces lipofer

暗鳞白鬼伞 Leucocoprinus bresadolae中国台湾根霉 Rhizopus formosensis

人胃粘膜细胞小双孢菌 Microbispora sp.

RBE, 人肝胆管细胞人非小细胞肺细胞

地衣芽孢杆菌 Bacillus licheniformis葡枝根霉 Rhizopus stolonifer

大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum贝叶多孔菌

Ca Ski(人宫颈上皮细胞)麦角甾苷

爪哇根霉 Rhizopus javanicus大鼠小肠平滑肌细胞*培养基

人卵巢成纤维细胞培养试剂盒说明书6-氯-2-甲喹啉分子式：77.63英文名称：6- -2- methyl group：92-46-6分子量： C0H8ClN

过氧锶分子式：9.6英文名称：Strontium oxide：34-8-7分子量： SrO2

(S)-3-双盐酸盐分子式：73.08英文名称：(S) -3- 3-aminopiperidine 2HCl：33468-07-4分子量： C5H4Cl2N2

甲达唑分子式：295.29英文名称：Mebendazole：343-39-7分子量： C6H3N3O3

N-乙-3-羟分子式：29.2英文名称：N- -3- hydroxy ethyl piperidine：3444-24-分子量： C7H5NO

性黄7英文名称：Acid yellow 7分子式：55.29分子量： C6H0Cl2N4Na2O7：6359-98-4

四氢巴马汀英文名称：Four Martin分子式：分子量：：6024-83-5

白桦脂英文名称：Betulinic acid分子式：456.70032分子量：C30H48O3：472-5-

性ATT英文名称：Acid black ATT分子式：分子量：：

对氯甲并噁唑分子式：243.69英文名称：The chloromethyl phenyl benzoxazole：57864-9-4分子量： C4H0ClNO

注意事项：
. 接收到人卵巢成纤维细胞培养试剂盒说明书，肉眼观察细胞培养基颜色，显微镜观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照（建议收到时的培养瓶拍一张照片，显微镜拍收到时的细胞00X,200X各一张）。
2.用75%的酒精消毒（建议配置75%的酒精的水是灭菌过的）。
3.严格无菌操作，打开细胞培养瓶。
4.将细胞培养瓶内的培养基用吸管*吸出（严禁直接倾倒），放入另一无菌容器中（建议换新的培养基培养细胞）。
5.用PBS 2-3ml/次轻轻洗细胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%-EDTA-.5ml,显微镜下观察细胞变圆，轻轻拍打培养瓶直到细胞脱落，加入终止液终止。
6.000rpm，5min离心，重悬细胞。
7.换新的细胞培养瓶，37℃，5%CO2培养。