小鼠肾小球内皮细胞培养试剂盒培养

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小鼠肾小球内皮细胞培养试剂盒【Mouse Kidney PrimaCell: Normal Endothelial Cells】
     小鼠肾小球内皮细胞培养试剂盒培养肾小球（glomerulus）为血液过滤器，肾小球毛细血管壁构成过滤膜。其中，小鼠肾小球内皮细胞分离自小鼠肾组织，肾小球内皮细胞是一类特殊微血管类型的细胞，能够调节肾小球过滤。它是组成过滤屏障内壁的重要部分，与肾小球的病理生理过程有关。小鼠肾小球内皮细胞传5代以上仍可以保持原代细胞的分化状态，进而可以用于评估体外药物模型系统和调节特定基因的遗传功能。 虽然肾小球内皮组织机械韧性很强，但利用本公司试剂盒中提供的肾小球内皮组织分离体系来分离，EDTA/EGTA处理过的肾小球内皮组织片能使得肾小球内皮细胞一些功能特性发生改变，从而将肾小球内皮细胞分离开来。

本试剂盒适用于分离培养小鼠肾小球内皮细胞。本体系提供了佳的组织分离条件，分离单个细胞的效率是已出版文献中所报道的5~6倍。此外，本体系还能保证所分离的细胞在培养基中具有很高的活性。利用的成纤维抑制体系，可以大程度地降低所培养的肾小球内皮原代细胞中成纤维细胞的含量。 小鼠肾小球内皮细胞培养试剂盒适合于培养小鼠的肾小球内皮细胞。本试剂盒包含： （）OptiTDSTM小鼠肾小球内皮细胞组织解离液 (3×ml) （2）小鼠肾小球内皮细胞组织处理缓冲液 (00ml) （3）FibrOutTM小鼠肾小球内皮细胞成纤维抑制剂 (ml（500x）) （4）小鼠肾小球内皮组织洗液(5 x 00 ml) （5）小鼠肾小球内皮细胞生长因子（ml500x）及血清（5x0ml） （6）小鼠肾小球内皮细胞基础培养基(5 x 00ml) （7）小鼠肾小球内皮组织预备液 ( x 00 ml) （8）小鼠肾小球内皮细胞培养试剂盒使用说明书
培养步骤：
小鼠肾小球内皮细胞培养试剂盒培养对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化-2分钟，然后在显微镜下观察Ⅱ型肺泡上皮细胞|细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按：2到：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按：2到：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二：可选择半数换液方式，弃去半数培养基后，将剩余细胞悬起，将细胞悬液按：2到：3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。​

泡盛曲霉 Aspergillus awamori小鼠肺动脉成纤维细胞*培养基

大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum地衣芽孢杆菌 Bacillus licheniformis

LM/TK(小鼠胸腺激酶缺陷细胞)苏云金芽胞杆菌多窝亚种 Bacillus thuringiensis subsp. tolwerthi

酸链球菌 Lactococcus lactis纤细正青霉 Eupenicillium gracilentum

HCT 6(人结肠细胞)香菇 Lentinula edodes

酿酒酵母 Saccharomyces cerevisiae6-0B, 人鼻咽细胞系

黑曲霉 Aspergillus niger糖化酵母 Saccharomyces diastaticus

大鼠脑成纤维细胞*培养基苜蓿中华根瘤菌

酸球菌亚种 Lactococcus lactis subsp.lactisRIN-m5f(大鼠胰岛β细胞瘤细胞)

阿舒假囊酵母 Crebrothecium ashbyii屎肠球菌 Enterococcus faecium

小鼠肾小球内皮细胞培养试剂盒培养*英文名称：Cefadroxil分子式：363.39分子量：C6H7N3O5S：66592-87-8

6-METHOXY-2-OXO-,2,3,4-TETRAHYDROQUINOLINE-4-CARBOXYLICACID英文名称：ACID 6-METHOXY-2-OXO-,2,3,4-TETRAHYDROQUINOLINE-4-CARBOXYLIC分子式：分子量： CHNO4：959237-42-4

2-(4-BOC-PIPERAZINYL)-2-(2-TRIFLUOROMETHYL-PHENYL)ACETICACID英文名称：2- (4-BOC-PIPERAZINYL) -2- (2-TRIFLUOROMETHYL-PHENYL) ACID ACETIC分子式：388.38分子量： C8H23F3N2O4：885274-23-7

罗卡因英文名称：Ropivacaine分子式：274.4分子量： C7H26N2O：84057-95-4

5-苄硫四氮唑分子式：92.24英文名称：5- benzylthio tetrazoline：287-47-6分子量： C3H6N4S

-CBZ-4--分子式：248.32英文名称：-CBZ-4- amino piperidine：57023-34-2分子量： C4H20N2O2

四溴甲分子式：449.8英文名称：Four bromine toluene：5442-9-8分子量： C0H0Br4

4-丁啉分子式：43.23英文名称：4- butyl morpholine：005-67-0分子量： C8H7NO

2-氯乙砜分子式：204.67英文名称：2- ethyl phenyl group：938-09-0分子量： C8H9ClO2S

2--5-甲吡分子式：08.4英文名称：2- amino -5- methyl pyridine：603-4-4分子量： C6H8N2

注意事项：
. 接收到小鼠肾小球内皮细胞培养试剂盒培养，肉眼观察细胞培养基颜色，显微镜观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照（建议收到时的培养瓶拍一张照片，显微镜拍收到时的细胞00X,200X各一张）。
2.用75%的酒精消毒（建议配置75%的酒精的水是灭菌过的）。
3.严格无菌操作，打开细胞培养瓶。
4.将细胞培养瓶内的培养基用吸管*吸出（严禁直接倾倒），放入另一无菌容器中（建议换新的培养基培养细胞）。
5.用PBS 2-3ml/次轻轻洗细胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%*-EDTA-.5ml,显微镜下观察细胞变圆，轻轻拍打培养瓶直到细胞脱落，加入终止液终止。
6.000rpm，5min离心，重悬细胞。
7.换新的细胞培养瓶，37℃，5%CO2培养。