小鼠肺泡巨噬细胞培养试剂盒说明书

小鼠肺泡巨噬细胞培养试剂盒【Mouse Alveolar PrimaCell: Normal Alveolar Macrophages】
  小鼠肺泡巨噬细胞培养试剂盒说明书巨噬细胞属免疫细胞，有多种功能，是研究细胞吞噬、细胞免疫和分子免疫学的重要对象。巨噬细胞容易获得，便于培养，并可进行纯化。巨噬细胞属不繁殖细胞群，在条件适宜下可生活2－3周，多用做原代培养，难以生存。 利用本公司试剂盒中提供的组织分离体系来分离，EDTA/EGTA处理过的组织能使得细胞一些功能特性发生改变，从而将平滑肌细胞分离开来。

本试剂盒适用于分离培养小鼠肺泡巨噬细胞。本体系提供了佳的组织分离条件，分离单个细胞的效率是已出版文献中所报道的5~6倍。此外，本体系还能保证所分离的细胞在培养基中具有很高的活性。利用的成纤维抑制体系，可以大程度地降低所培养的巨噬细胞中成纤维细胞的含量。 小鼠肺泡巨噬细胞培养试剂盒适合于培养小鼠的肺泡巨噬细胞。本试剂盒包含： （）OptiTDSTM小鼠肺泡巨噬细胞组织解离液（3×ml） （2）小鼠肺泡巨噬细胞组织处理缓冲液（00ml） （3）FibrOutTM小鼠肺泡巨噬细胞成纤维抑制剂（ml（500X）） （4）小鼠肺泡巨噬组织洗液（5 x 00 ml） （5）小鼠肺泡巨噬细胞生长因子（ml500X）及血清（5x0ml） （6）小鼠肺泡巨噬细胞基础培养基（5 x 00ml） （7）小鼠肺泡巨噬组织预备液（ x 00 ml） （8）小鼠肺泡巨噬细胞培养试剂盒使用说明书

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注意事项：
. 接收到小鼠肺泡巨噬细胞培养试剂盒说明书，肉眼观察细胞培养基颜色，显微镜观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照（建议收到时的培养瓶拍一张照片，显微镜拍收到时的细胞00X,200X各一张）。
2.用75%的酒精消毒（建议配置75%的酒精的水是灭菌过的）。
3.严格无菌操作，打开细胞培养瓶。
4.将细胞培养瓶内的培养基用吸管*吸出（严禁直接倾倒），放入另一无菌容器中（建议换新的培养基培养细胞）。
5.用PBS 2-3ml/次轻轻洗细胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%-EDTA-.5ml,显微镜下观察细胞变圆，轻轻拍打培养瓶直到细胞脱落，加入终止液终止。
6.000rpm，5min离心，重悬细胞。
7.换新的细胞培养瓶，37℃，5%CO2培养。

培养步骤：
小鼠肺泡巨噬细胞培养试剂盒说明书对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化-2分钟，然后在显微镜下观察Ⅱ型肺泡上皮细胞|细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按：2到：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按：2到：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二：可选择半数换液方式，弃去半数培养基后，将剩余细胞悬起，将细胞悬液按：2到：3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。​

根瘤菌 Rhizobium sp.

C4-2(人前列腺细胞)5×06cells/瓶×2

地衣芽孢杆菌 Bacillus licheniformis

SW626(人卵巢细胞)5×06cells/瓶×2

植物杆菌 Lactobacillus plantarum

松杉暗孔菌 Phaeolus schweinitzii

人心房肌细胞*培养基00mL

QBC-939, 人胆管细胞 Human

地衣芽孢杆菌 Bacillus licheniformis

大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum

小鼠肺泡巨噬细胞培养试剂盒说明书邻二硝分子式：68.英文名称：Two nitrobenzene：528-29-0分子量： C6H4N2O4

乙二乙英文名称：Ethylene glycol ether分子式：90.2分子量： C4H0O2：0-80-5

邻硝对甲砜氯分子式：235.64英文名称：Ortho para nitro group：3565分子量： C7H6ClNO4S

--3-甲-5-吡唑分子式：73英文名称：- phenyl -3- methyl -5-：3-8-6分子量： C0HN3

2-啉分子式：63.6英文名称：2- chloride：62-62-4分子量： C9H6ClN

5-溴-8-硝异喹啉分子式：253.06英文名称：5- -8- nitro group：63927-23-分子量： C9H5BrN2O2

2,3,5,6-四氟吡分子式：5.06英文名称：2,3,5,6- Pyridines：2875-8-5分子量： C5HF4N

英文名称：Up to that分子式：337.46分子量： C22H27NO2：7230-88-5

柴胡皂苷D英文名称：Radix D分子式：780.98分子量：C42H68O3：20874-52-6

性媒介绿GS英文名称：Acid medium green GS分子式：46.38分子量： C20H3N2NaO5S：6408-78-2