大鼠食管平滑肌细胞培养试剂盒说明书

大鼠食管平滑肌细胞培养试剂盒【Rat Esophagus PrimaCell: Normal Esophageal Smooth Muscle Cells】
  大鼠食管平滑肌细胞培养试剂盒说明书食管是咽和胃之间的消化管。食管在系统发生上起初很短，随着颈部的伸长和心肺的下降，而逐渐增长。。其中，食管平滑肌细胞是食管运动细胞，食团吞咽后由咽腔进入食管上端，食管肌肉即发生波形蠕动，使食团沿食管下行至胃。大鼠食管平滑肌细胞可以保持原代细胞的分化状态，进而可以用于评估体外药物模型系统和调节特定基因的遗传功能。 虽然食管平滑肌组织机械韧性很强，但利用本公司试剂盒中提供的食管平滑肌组织分离体系来分离，EDTA/EGTA处理过的食管平滑肌能使得平滑肌组织中平滑肌细胞的一些功能特性发生改变，从而将食管平滑肌细胞细胞分离开来。

本试剂盒适用于分离培养大鼠食管平滑肌细胞。本体系提供了佳的组织分离条件，分离单个细胞的效率是已出版文献中所报道的5~6倍。此外，本体系还能保证所分离的细胞在培养基中具有很高的活性。利用的成纤维抑制体系，可以大程度地降低所培养的食管平滑肌原代细胞中成纤维细胞的含量。

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注意事项：
. 接收到大鼠食管平滑肌细胞培养试剂盒说明书，肉眼观察细胞培养基颜色，显微镜观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照（建议收到时的培养瓶拍一张照片，显微镜拍收到时的细胞00X,200X各一张）。
2.用75%的酒精消毒（建议配置75%的酒精的水是灭菌过的）。
3.严格无菌操作，打开细胞培养瓶。
4.将细胞培养瓶内的培养基用吸管*吸出（严禁直接倾倒），放入另一无菌容器中（建议换新的培养基培养细胞）。
5.用PBS 2-3ml/次轻轻洗细胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%-EDTA-.5ml,显微镜下观察细胞变圆，轻轻拍打培养瓶直到细胞脱落，加入终止液终止。
6.000rpm，5min离心，重悬细胞。
7.换新的细胞培养瓶，37℃，5%CO2培养。

培养步骤：
大鼠食管平滑肌细胞培养试剂盒说明书对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化-2分钟，然后在显微镜下观察Ⅱ型肺泡上皮细胞|细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按：2到：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按：2到：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二：可选择半数换液方式，弃去半数培养基后，将剩余细胞悬起，将细胞悬液按：2到：3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。​

CD20 / MS4A 抗體 (PerCP), 兔單抗 FCM    25 Test

IL8R / CD28a 抗體, 兔多抗, 抗原親和純化 ELISA    50 µg

ACAN 抗體, 兔多抗, 抗原親和純化 IHC-P    50 µg

ILRL 抗體, 兔多抗 ELISA   WB    400 µg

CD5 抗體, 兔多抗, 抗原親和純化 IHC-P    50 µg

IFNAR2 / IFNABR 抗體, 兔多抗 ELISA    400 µg

Endoglin / CD05 / ENG 抗體, 鼠單抗 ELISA    50 µg

CD47 / EMMPRIN / Basigin 抗體 (FITC), 鼠單抗 FCM   IF   ICC/IF   25 Test

CD20 / MS4A 抗體 (APC), 兔單抗 FCM    25 Test

CALCA / CGRP 抗體, 兔多抗, 抗原親和純化 ELISA    50 µg

大鼠食管平滑肌细胞培养试剂盒说明书4--2-氯嘧分子式：29.55英文名称：4- amino -2-：746-50-9分子量： C4H4ClN3

知母皂苷A-Ⅲ英文名称：Timosaponin A- III分子式：740.92分子量： C39H64O3：4059-79-4

菝葜皂苷元英文名称：Sarsasapogenin分子式：46.64分子量： C27H44O3：26-9-2

乙丙酯英文名称：Acetic acid acrylic ester分子式：分子量：：

槟榔碱英文名称：Arecoline分子式：236.分子量：C8H4BrNO2：300-08-3

4-(2-代乙酰)-2,2,6,6-四甲--氧自由分子式：339.2英文名称：4- (2- iodobenzofuran carbamoylmethyl) -2,2,6,6- four -- methyl piperidine oxygen radicals：2573-24-0分子量： CH20IN2O2

分子式：246.74英文名称：Hydrochloric acid naphthalene：550-99-2分子量： C4H5ClN2

2,5-二氯-3-硝吡分子式：92.98英文名称：2,5- two -3- nitro pyridine：2427-62-3分子量： C5H2Cl2N2O2

氯-乙酯甲-3-甲咪唑分子式：204.65英文名称：Chlorinated - ethyl methyl -3-：分子量： C8H3ClN2O2

2-氯吡分子式：3.55英文名称：2- chloride：09-09-分子量： C5H4ClN