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小鼠垂体瘤细胞;GT1-1说明书

小鼠垂体瘤细胞;GT1-1说明书

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小鼠垂体瘤细胞;GT1-1说明书 详细资料

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细胞名称 小鼠垂体瘤细胞;GT1-1说明书
形态特性 上皮样

生长特性 贴壁生长

特征特性 GT1-1为GT1细胞系的亚克隆,GT1来源于稳定表达SV40大T抗原的转基因小鼠产生的可以分泌促性腺释放LHRH的肿瘤。GT1-1细胞可以表达pro-LHRH mRNA,并向培养基中分泌LHRH样的免疫反应性的物质。

培养条件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 5%FBS+5%HS

传代方法 1:3传代;5~7天1次。

传代情况 P20

冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS

支原体检测 培养法(-)

STR -

同工酶

染色体

主要功能:
(1)小鼠垂体瘤细胞;GT1-1说明书血管平滑肌细胞的再生能力是原发血管病变的重要因素。
(2)表达钙通道及ICAM-1和VCAM-1,参与血管壁的炎症反应。
(3)与血管疾病的进展和稳定有关。
 生理变化:
(1)主动脉硬化。
(2)主动脉瘤
(3)主动脉钙化。
基本特性:
(1)小鼠垂体瘤细胞;GT1-1说明书组织来源于正常大鼠大动脉组织。
(2)鉴定:肌动蛋白,alpha-SMA和Desmin免疫荧光染色。
(3)原代细胞培养末期液氮冻存。
(4)每冻存管细胞数:>5×105 cells/1ml。
(5)肌动蛋白,alpha-SMA和Desmin免疫荧光染色验证。
(6)不含有HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。

运输和保存:
小鼠垂体瘤细胞;GT1-1说明书视天气状况和运输距离远近,公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行。
1)1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中,置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输;收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养,如无法立刻进行复苏操作,冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月。
2)T-25培养瓶充满完全培养基后进行常温运输;收到细胞后请镜下观察细胞生长状态,如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作,如悬浮的细胞较多,请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁。
具体操作:
1.预热培养用液:把已经配制好的装有培养液、PBS液和胰蛋白酶的瓶子放入37℃水浴锅内预热。
2.用75%酒精擦拭经过紫外线照射的超净工作台和双手。
3.正确摆放使用的器械:保证足够的*作空间,不仅便于*作而且可减少污染。
4.点燃酒精灯:注意火焰不能太小。
5.准备好将要使用的消毒后的空培养瓶,放入微波炉内高火,8分钟再次消毒。
6.取出预热好的培养用液:大鼠主动脉平滑肌细胞取出已经预热好的培养用液,用酒精棉球擦拭好后方能放入超净台内。
7.从培养箱内取出细胞:注意取出细胞时要旋紧瓶盖,用酒精棉球擦拭显微镜的台面,再在镜下观察细胞。
8.打开瓶口:将各瓶口一一打开,同时要在酒精灯上烧口消毒。

蝙蝠葛苏林碱 CAS 70553-76-3 订购|咨询  规格: 10mg

五指毛桃 CAS  订购|咨询  规格: 1g

10-姜酚 CAS 23513-15-7 订购|咨询  规格: HPLC≥98%;20mg

环维黄杨星D CAS  订购|咨询  规格: 20mg

大叶茜草素 CAS 55481-88-4 订购|咨询  规格: 20mg

续断(川续断) CAS  订购|咨询  规格: 3g

胶乳粒子标准物质(20μm) CAS  订购|咨询  规格: 10mL

甘草次酸;18 β-Glycyrrhet CAS 471-53-4 订购|咨询  规格: 20mg

天素;Gastrodin CAS 62499-27-8 订购|咨询  规格: 20mg

可可碱;Theobromine CAS 83-67-0 订购|咨询  规格: 50mg

奇任醇 CAS 52659-56-0 订购|咨询  规格: HPLC≥98%;20mg/vial

槲皮素;Quercetin CAS 117-39-5 订购|咨询  规格: 100mg

小鼠垂体瘤细胞;GT1-1说明书Rabbit Anti-chicken IgG/Bio  生物素标记的兔抗鸡IgG 规格: 0.1mlc-Myb  转录激活因子MYB抗体 规格: 0.2ml

Cip4  细胞分化周期CDC42相互作用蛋白4抗体 规格: 0.2ml

HSD17B3  羟类固醇脱酶17β3抗体 规格: 0.2ml

CPSA(C2F9)  复合前列特异性抗原单克隆抗体 规格: 0.2ml

OPCML  片样物质结合蛋白/细胞粘附分子样蛋白抗体 规格: 0.1ml

Bax  Bax抗体 规格: 0.1ml

GPV/Goose parvovirus  鹅细小病毒GPV抗体 规格: 0.2ml

Goat Anti-Mouse IgM  羊抗小鼠IgM 规格: 1mg

ADM (ProAM-N20)  上髓质素抗体(N端20肽) 规格: 0.1ml

SCEL  SCEL蛋白抗体 规格: 0.2ml

Phospho-RelB(Ser552)  磷酸化核转录因子NFKB-RelB蛋白抗体 规格: 0.1ml

操作流程:
1.1 小鼠垂体瘤细胞;GT1-1说明书主要试剂与仪器:倒置相差显微镜(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293细胞的复苏培养传代及冻存:
1.2.1 细胞的复苏培养 从液氮罐中取出冻存管,立即投入37℃水浴,并不断的摇动,使之迅速融化。 将溶解的细胞冻存管取出,用酒精消毒后打开,吸出溶有细胞的冻存液,加入事先装好培养液(37℃预热,8~10倍体积)离心管内,稍微吹打混匀,然后1000rpm 5min,去除上清,加入适量培养液,吹打成细胞悬液, 以1×105/ml密度接种于25cm2培养瓶内,在37℃、5%co2及饱和湿度下培养。
1.2.2 细胞传代 原代培养的hek-293细胞48h换液1次,细胞长至60%~70%融合时,用0.25%胰酶消化1~2min,将培养瓶再用手掌轻轻敲打使细胞脱壁、悬浮、分散,为使细胞进一步分散可用吹打管轻轻吹打几次,获得细胞悬液,然后加入倍量的培养基,温和混匀,吸管分装混合液,传代扩增细胞。
1.3 细胞形态的观察 在倒置显微镜下观察并记录细胞的生长情况及形态特征。
1.4 细胞的计数 常规消化细胞,待细胞变圆、脱壁并浮起,加入少量培养基离心,再用pbs重悬并吹打制成细胞悬液。在细胞计数板盖玻片的一侧加微量细胞悬液,用10×物镜观察计数板四角大方格细胞数,按公式计算出细胞数。细胞数/ml原液=(四方格细胞数之和/4) ×104。
1.5 细胞的贴壁率 指数生长期的细胞,以0.25%胰酶消化成单细胞悬液,计数后分别接种于12个25cm2培养瓶中,每两小时随机取出3瓶细胞,吸除培养基及未贴壁细胞,加入胰消化酶消化、计数已贴壁细胞,取其平均值,按照公式:贴壁率(%)=(已贴壁细胞数/接种细胞数) ×100%,计算贴壁率。 
1.6 生长曲线 取指数生长期的细胞用胰酶消化制成单细胞悬液,以1×104/孔接种于24孔板,每孔加入1ml培养基。每天随机取3孔,计数每孔细胞的数目并计算平均值。连续计数10d,绘制细胞生长曲线

 

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