小鼠杂交瘤细胞株；2D-2说明书

注意事项：
. 接收到小鼠杂交瘤细胞株；2D-2说明书，肉眼观察细胞培养基颜色，显微镜观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照（建议收到时的培养瓶拍一张照片，显微镜拍收到时的细胞00X,200X各一张）。
2.用75%的酒精消毒（建议配置75%的酒精的水是灭菌过的）。
3.严格无菌操作，打开细胞培养瓶。
4.将细胞培养瓶内的培养基用吸管完全吸出（严禁直接倾倒），放入另一无菌容器中（建议换新的培养基培养细胞）。
5.用PBS 2-3ml/次轻轻洗细胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%-EDTA-.5ml,显微镜下观察细胞变圆，轻轻拍打培养瓶直到细胞脱落，加入终止液终止。
6.000rpm，5min离心，重悬细胞。
7.换新的细胞培养瓶，37℃，5%CO2培养。 

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细胞名称 小鼠杂交瘤细胞株；2D-2说明书
形态特性 母细胞样

生长特性 悬浮生长

特征特性 该细胞属保藏，其特征特性尚未公开。

培养条件 MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 0%FBS

传代方法 :3传代，3-4天传次

传代情况 C5

冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS

支原体检测 阴性

STR

同工酶

染色体

培养步骤：
小鼠杂交瘤细胞株；2D-2说明书对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化-2分钟，然后在显微镜下观察Ⅱ型肺泡上皮细胞|细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按：2到：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按：2到：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二：可选择半数换液方式，弃去半数培养基后，将剩余细胞悬起，将细胞悬液按：2到：3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。​

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小鼠杂交瘤细胞株；2D-2说明书盐酸赛庚分子式：323.86英文名称：Cyproheptadine hydrochlorideCAS号：4354-29-4分子量： C2H22ClN

2-甲-5-丙酰呋喃分子式：38.6英文名称：2- methyl -5-CAS号：0599-69-6分子量： C8H0O2

4-溴甲砜分子式：235.英文名称：4- bromo methyl sulfoneCAS号：3466-32-8分子量： C7H7BrO2S

(DNP)2,4-二硝分子式：98.4英文名称：(DNP) 2,4- two, 4-dinitrophenylhydrazineCAS号：9-26-6分子量： C6H6N4O4

4，4-双(2-磺酸钠乙)联分子式：562.56英文名称：4, 4- bis (2- sulfonic acid sodium styrene group).CAS号：27344-4-8分子量： C28H20Na2O6S2

氯锰分子式：97.9英文名称：Manganese chlorideCAS号：3446-34-9分子量： MnCI2•4H2O

6-溴-2,2'-二吡分子式：235.08英文名称：6- -2,2'- twoCAS号：0495-73-5分子量： C0H7BrN2

,4-双(二甲氯甲硅烷)分子式：263.3英文名称：,4- bis (two methyl chloride) benzeneCAS号：078-97-3分子量： C0H6Cl2Si2

2-甲-5-溴嘧分子式：73英文名称：2- methyl -5-CAS号：7752-78-5分子量： C5H5BrN2

正壬英文名称：Pelargonic acid分子式：58.24分子量： C9H8O2CAS号：2-05-0

考马斯亮蓝R250英文名称：Kaumas blue R250分子式：825.97分子量： C45H44N3NaO7S2CAS号：604-59-2