细胞处理:
1) 冻存细胞的复苏:
将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入到含4-6mL培养基的离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心3-5min,弃去上清液,培养基重悬细胞。然后将细胞悬液加入含6-8ml培养基的培养瓶(或皿)中37℃培养过夜。第二天显微镜下观察细胞生长情况和细胞密度。
2) 细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于贴壁细胞传代可以参考以下方法:
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加入0.25%(w / v)-0.53 mM EDTA于培养瓶中(T25瓶1-2mL,T75瓶2-3mL),置于37℃培养箱中消化1-2分钟(难消化的细胞可以适当延长消化时间),然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加入3-4ml含10%FBS的培养基来终止消化。
3.轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心3-5min,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。将细胞悬液按1:2的比例分到新T25瓶中,添加6-8ml按照说明书要求配置的新的培养基以保持细胞的生长活力,后续传代根据实际情况按1:2~1:5的比例进行。
3)细胞冻存: 收到细胞后建议在培养前3代时冻存一批细胞种子以备后续实验使用。
P3X63Ag8 (小鼠骨髓瘤细胞)
商品属性
鉴定 | STR鉴定正确 | 种属 | 小鼠 |
生长特性 | 悬浮 | 细胞形态 | 淋巴母细胞样 |
规格 | 1×10⁶cells/T25培养瓶 | 分类 | 小鼠细胞系 |
商品介绍
别称 P3-X63-Ag8; P3/X63-Ag8; P3/X63/Ag8; P3-X63Ag8; P3X63 Ag8; X63-Ag8; X63-AG8; x63-Ag8; P3X63; X63; GM03571
种属 小鼠
年龄(性别) 不详
组织来源 B淋巴细胞;浆细胞;骨髓瘤
生长特性 悬浮细胞
细胞形态 淋巴母细胞样
参考资料(来源文献)
P3X63Ag8细胞源自P3K细胞株(源自浆细胞MOPC-21的组织培养株),P3X63Ag8能抗0.1mM 8-氮杂,但在HAT培养基中死亡。据报道,P3X63Ag8细胞是缺失了3-酮类固醇还原酶活性的胆营养缺陷型细胞。 |
生物安全等级 1
生长培养基 DMEM+10% FBS+1% P/S
推荐传代比例 2×10^5cells/mL
推荐换液频率 2~3次/周
倍增时间 ~16-26小时
冻存条件
冻存液:55% 基础培养基+40%FBS+5%DMSO
温度:液氮
培养条件
气相:空气,95%;CO2,5%
温度:37℃
抗原表达情况 H-2d
基因表达情况 immunoglobulin; monoclonal antibody
注意事项 该细胞为悬浮细胞,请注意离心收集细胞悬液;请勿直接倒掉细胞培养液。
细胞传代培养操作步骤:
(1)当显微镜下细胞形态和生长密度达到90%时,进行传代。
(2)吸弃培养液。添加PBS清洗1~2次,摇匀后弃掉。
(3)加入覆盖瓶底量的且含有EDTA。
(4)培养瓶放入37℃培养箱进行消化,3min左右拿出,用显微镜观察细胞有无超过80%的量,发生收缩变圆、细胞间隙变大。轻轻拍打培养瓶使剩余细胞脱落,加入2倍量的中止消化,并吹打均匀,避免消化过度。
(5)细胞悬液吸至离心管内,1000rpm/min离心3~5min。
(6)吸弃上清,加入培养液重悬细胞,吹打细胞使其均匀分散。
(7)吸弃细胞悬液,选择适合的密度接种到新培养瓶中,补充培养液并摇匀,放置37℃的CO2培养箱进行培养。
(8)根据细胞生长状态确定换液或传代时间。
(9)细胞冻存
细胞接收后的处理:
1)收到细胞后,75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h,若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染,请拍照后及时联系我们。
2)请在4或5X显微镜下确认细胞状态,同时给刚收到的细胞拍照(10×,20×)各2-3张以及培养瓶外观照片一张留存,作为售后时收到时细胞状态的依据。
3)贴壁细胞:细胞在37℃培养箱中放置2-3h,显微镜下观察细胞的生长和贴壁情况,有些贴壁细胞在快递运送过程中会因振动脱落和脱落后成团的情况。若镜下观察细胞的生长密度若在60%以下,可去除培养瓶中灌液培养基(若有未贴壁的细胞需要离心回收,重悬打入到原培养瓶中),加入新配制的培养基6-8mL,放到细胞培养箱中继续培养。若细胞生长密度达70%-80%以上,可以对细胞进行传代处理。传代过程中,若因运输振动脱落的细胞需要离心回收。
公司正在出售的产品:
大鼠白细胞抗原DR(HLA-DR)检测试剂盒 ,英文名: HLA-DR ELISA Kit
Lactamase inhibitors (BLI) ELISA Kit 小鼠β内酰胺酶抑制剂(BLI)检测试剂盒
ELISA 小鼠Foxp3(mouse Foxp3) 进口分装
CLIAKitforirGH(HumanImmunoreactivegrowthhormone)ELISAKit人免疫反应性生长激素
通用型(CO2)浓度酶偶联反应比色法定量检测试剂盒50次
ELISAKitTNF-α大鼠肿瘤坏死因子α
HA重组甲型流感 H7N9 (A/Shanghai/1/2013) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 Protein
phospho-Smad2(p-Ser465 0.5mgphospho-Smad2(p-Ser465)petide 0酸化Smad2抗原
COCH重组人 Cochlin / COCH 蛋白 Protein
IL17RB Protein Human 重组人 IL17BR / IL17RB / IL-17 Receptor B 蛋白
CSF2 Protein Human 重组人 GM-CSF / CSF2 蛋白 (Fc 标签)
phospho-Smad2(p-Ser465 0.5mgphospho-Smad2(p-Ser465)petide 0酸化Smad2抗原
IL17RB Protein Human 重组人 IL17BR / IL17RB / IL-17 Receptor B 蛋白
HA重组甲型流感 H7N9 (A/Shanghai/1/2013) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 Protein
CSF2 Protein Human 重组人 GM-CSF / CSF2 蛋白 (Fc 标签)
COCH重组人 Cochlin / COCH 蛋白 Protein
P3X63Ag8 (小鼠骨髓瘤细胞)豚鼠免疫球蛋白G(IgG)ELISA 试剂盒 96T/48T
Human cytotoxin (CTX) ELISA Kit 人细胞毒素(CTX)检测试剂盒
Humanai-cardiolipinaibodyIgG,ACA-IgGELISAKit 人抗心0脂抗体IgG(ACA-IgG)检测试剂盒 96T/48T 进口分装
humanC-typelectindomainfamily4membere,CLEC4E检测试剂盒人C型凝集素结构域家族4成员E(CLEC4E)检测试剂盒规格:96T/48T
组织EPHB2激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C)20次
HumanProinsulin,PIELISAKit人胰岛素原(PI)检测试剂盒规格:96T/48T
三0酸腺苷酶 英文名称: Rat Adenosine iphosphate 规格: 英文缩写: ATP
大鼠半胱天冬蛋白酶3 英文名称: active cysteine-aspaic acid protease-3 规格: 英文缩写: Active Caspase-3
大鼠半胱天冬蛋白酶7 英文名称: active cysteine-aspaic acid protease-7 规格: 英文缩写: Active Caspase-7
大鼠半胱天冬蛋白酶8 英文名称: active cysteine-aspaic acid protease-8 规格: 英文缩写: Active Caspase-8
MIN6(小鼠胰岛瘤细胞) | CATH.a(小鼠神经细胞) | EMT6 EMT-6 (小鼠乳腺癌细胞) | Renca RenCa (小鼠肾癌细胞) |
MLO-Y4 MLOY4 (小鼠骨样细胞) | NIT-1 (小鼠胰岛素瘤β细胞) | TtT/GF (小鼠垂体促甲状腺滤泡星状细胞) | WEHI 164 (鼠纤维肉瘤细胞) |
LM9 (小鼠HGPRT基因缺陷型骨肉瘤细胞) | TC-1 (小鼠肺上皮细胞) | ||