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Super Tube (狗肾细胞)

Super Tube (狗肾细胞)

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Super Tube (狗肾细胞) 详细资料

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本公司所有产品仅供科学实验,不做其他科学实验外的使用!

种属


规格

1×10cells/T25培养瓶

生长特性

贴壁

鉴定

STR鉴定正确

细胞形态

上皮细胞样

编号

GOY-01X0469

 

商品详情:

Super Tube (狗肾细胞)

别称 MDCK supertube; SuperTube

种属 狗

年龄(性别) 雌性,成年

组织来源 正常肾

生长特性 贴壁细胞

细胞形态 上皮细胞样

背景描述从表观正常的成年雌性可卡犬中建立了细胞株MDCK,从中克隆建立了狗上皮样细胞株Super Tube细胞。当维持高细胞浓度时,Super Tube细胞形成大量的小管(据报道,24孔板的每孔铺7×10^5细胞,3天内就能形成小管)。要形成小管,Super Tube细胞需要每天两次换液以提供足够养分。与原始细胞株相比,Super Tube细胞的c-AMP的检测水平低得多,在毛喉素刺激下读出的腺苷环化酶水平也低;Super Tube细胞的跨上皮抗性也比Super DomeMDCK都低。

生物安全等级 1

生长培养基 DMEM/F120.05mM NEAA10% FBS1% P/S

推荐传代比例 1:3-1:4

推荐换液频率 2~3/

冻存条件

冻存液:55% 基础培养基+40%FBS+5%DMSO

温度:液氮

培养条件

气相:空气,95%CO25%

温度:37

细胞培养操作:

Super Tube (狗肾细胞)
1) 复苏细胞:以下细胞培养冻存处理仅供参考,具体操作步骤以随货产品说明书为主。

将含有1 mL细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加4 mL培养基混合均匀。在1000 rpm条件下离心3 min,弃去上清液,加1-2 mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入含适量培养基的培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入6 cm皿中,加入约4 mL培养基,培养过夜)。第三天换液并检查细胞密度。

2) 细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。

a、弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。

b、加1 mL消化液(0.25%Trypsin-0.02% EDTA)于培养瓶中,使消化液浸润所有细胞,将培养瓶置于37℃培养箱中消化1 -3min(视细胞消化情况而定),然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加2-3ml培养基终止消化。轻轻打匀后装入无菌离心管中,1000 rpm离心5 min,弃去上清液,补加1-2 mL培养液后吹匀。

c、将细胞悬液按1:2比例分到新的含8 mL培养基的新皿中或者瓶中,置于培养箱中培养。

3) 细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为例;

a、收集细胞及细胞培养液,装入无菌离心管中,1000 rpm条件下离心4 min,弃去上清液,用PBS清洗一遍,弃尽PBS,进行细胞计数。

b、根据细胞数量加入无血清细胞冻存液,使细胞密度5×106~1×107/mL,轻轻混匀,每支冻存管冻存1mL细胞悬液,注意冻存管做好标识。

c、将冻存管放入-80℃冰箱,24 h后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。

Super Tube (狗肾细胞)

细胞培养注意事项 

Super Tube (狗肾细胞)
一、 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,若有上述现象 发生请及时和我们联系。

二、仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需 细胞因子等,确保细胞培养条件一致,若由于培养条件不一致而导致细胞出现问题,责任由 客户自行承担。

三、用 75%酒精擦拭细胞瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题,部分细胞由于温度 变化及剧烈碰亡破碎形成碎片,是正常现象。观察好细胞状态后,75%酒精消毒瓶壁将 T25 瓶置于 37℃培养箱放置 2-4h。

四、贴壁细胞可以消化,悬浮细胞直接混匀收集细胞,900 rpm-1000 rpm 离心 3 min,弃上 清。加 5 mL PBS 重悬细胞,再 900 rpm-1000 rpm 离心 3 min,,用新鲜的培养基重悬 细胞,并接种到新的培养瓶或培养皿中,置于培养箱中进行培养。

五、 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。

六、 建议客户收到细胞后前 3 天各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和我司技术部沟通 交流。由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联系,告知细胞 的具体情况,以便我们的技术人员跟踪回访直至问题解决。

七、该细胞仅供科研使用。

八、备注:运输用的培养基 (灌液培养基) 不能再用来培养细胞,请换用按照说明书细胞培 养条件新配制的培养基来培养细胞。     收到细胞后第一次传代建议 1:2 传代 。

九、 注意:  1:2 传代就是 1 个 T25 瓶传 2 个 T25 瓶或者 2 个 6cm 皿。不是 1 个 T25 瓶传 2 个10cm 皿。

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